质粒瞬转有疑问?答案全在这里了!
01】做瞬转可以复苏细胞的时候直接加质粒吗?
不可以,转染是通过物理或化学方法将外源 DNA转入细胞的过程,磷酸钙转染法和脂质体转染法为例,两种方法都需要在转染24h 前进行细胞传代,且细胞密度达到70%-80%方可进行转染实验。而细胞复苏后, 细胞未达到最佳的状态,活力为完全恢复,细胞密度未达到要求,故而不可用复苏细胞直接加质粒进行实验。
【02】细胞密度(%汇合度)会影响转染效率吗?
是的,细胞密度会影响转染性能。细胞汇合度在 70-90%时具有优异的转染性能
【03】细胞传代次数会影响转染效率吗?
传代次数可能会影响转染实验。传代次数过多可能会降低转染效率。我们不推荐超过20-30 次传代的细胞。如果转染性能下降并且细胞已经培养过很长时间或过度不当传代,我们建议您从液氮中复苏一管新细胞重新培养。
【04】关于转染试剂的选择,有什么推荐?
同一种转染试剂对于不同的细胞系和细胞,其转染效果都不一样,建议您查看相关推荐后选择最适合的转染试剂。